人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒是體內(nèi)重要的尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,對(duì)人體尿酸的代謝和排泄起著至關(guān)重要的作用。而人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1ELISA試劑盒,能夠測(cè)試樣本中URAT1的濃度值,以評(píng)估其在人體中的功能和活性。該試劑盒是一種間接ELISA檢測(cè)方法,首先在板上涂覆已充分純化的URAT1抗原,與待測(cè)的樣本中的URAT1結(jié)合,然后加入一定濃度的URAT1檢測(cè)抗體,可與抗原中的URAT1發(fā)生特異性識(shí)別結(jié)合,生成V字形結(jié)構(gòu)。接著加入酶標(biāo)記二抗,二抗與URAT1檢測(cè)抗體結(jié)合,產(chǎn)生特異性抗體結(jié)構(gòu),用染色劑顯色從而得出樣本中的URAT1濃度值。
人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒具體步驟如下:
1.準(zhǔn)備樣品:樣品分為細(xì)胞裂解液和真實(shí)樣本兩種。細(xì)胞裂解液需要進(jìn)行蛋白含量的測(cè)定,然后稀釋至相同濃度。真實(shí)樣本需要離心去除顆粒,不可稀釋。
2.加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入96孔板中,并配置蛋白降解液,經(jīng)加熱處理后靜置,使尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1能夠釋放出來(lái)。
3.洗滌:將板子拍干,加入洗滌緩沖液,反復(fù)洗滌,使非特異性吸附物被清洗掉。
4.孵育:加入專門(mén)抗尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1的抗體,然后加入二抗,進(jìn)行一定時(shí)間的孵育。
5.二級(jí)結(jié)合:加入HRP標(biāo)記的抗體,進(jìn)行二級(jí)結(jié)合反應(yīng)。
6.洗滌:反復(fù)洗滌,保證干凈無(wú)雜質(zhì)。
7.顯色:添加TMB顯色液,進(jìn)行反應(yīng),最后加入停止溶液,讀取A值。
通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品的光密度與濃度關(guān)系的斜線確定樣本中尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1的濃度值,進(jìn)而據(jù)此得出實(shí)驗(yàn)樣本的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1的表達(dá)水平和活性。
總之,人尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1elisa試劑盒是一種可靠、高效的檢測(cè)試劑盒,可用于臨床檢測(cè)和研究中。